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第16章 完美的PCR实验

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吴妍知道,周文肯定有特殊的提取手法。

不过见他不愿意说,她也没有强求,毕竟这是别人的看家本领,泄露出去有害无益。

随后两个人又谈了一下待遇问题,吴妍把之前对石磊说的话,跟周文又讲了一遍,最后笑问道:“你还有什么问题吗?”

周文想到了任务,说:“能不能问一下,我算是合同工还是正式工啊?”

“这个嘛……”吴妍迟疑了一下,她没想到周文会问这个问题。

现在生物生什么情况,她相信周文心里应该很清楚,江州市第一人民医院的合同,而且还那么优厚,别说他一个小小的本科生了,即使生物硕士生、博士生,很多人也是求之不得呢。

他居然还想一步登天,直接解决编制问题,真的有些过分了,她自己到现在还是合同工呢。

吴妍想了想说:“一般来说,如果是院里聘用的话,那肯定是正式工,但你这是检测中心PCR组的聘用合同,所以恐怕只能是合同工了。”

“合同工啊……”周文迟疑着。

其实合同工还是正式工,他真得无所谓,只要能让他到检测中心去实习实践,就算临时工他也愿意。

这不是任务要求在一个礼拜内成为正式工嘛,他不能不抻着点。

1000点经验值和1000点积分呢,还有一次开黑铁箱子的机会。

吴妍原本以为事情已经办妥了呢,没想到这里又节外生枝了,于是苦口婆心说:“你虽然是合同工,但是待遇是按照正式工来算的,并没有差在哪里。

另外嘛,什么事都是一步步来的,你先上班,编制问题等过一段时间再解决也不迟嘛。”

周文笑问道:“你是我学姐,而且也在医院上了一年班了,你说实话,我如果真签了合同工,编制大概什么时候能解决?”

“这个嘛……”吴妍有些尴尬,端起咖啡杯掩饰了一下。

等放下杯子后,吴妍说:“那这样吧,我帮你回去问问。但说实话,你不要抱太大期望。”

周文点点头,笑道:“行,那就麻烦学姐了。”

“不客气。”

周文那边还在离心呢,也没有多待,客气了几句便起身离开了。

……

回到实验室时,杨宇东和顾红云迫不及待的问他面试成功没有?

周文笑呵呵的说:“我提了个条件,她说要回去跟领导商量商量,等商量之后再给我准信。”

杨宇东无语道:“条件都那么优越了,你还要提条件啊?”

周文说:“我这不是看机会难得嘛,就想试试他们的底价。”

杨宇东:“……”

他真想用提取枪把周文脑浆抽出来一点,看他脑子里一天到晚到底在想些什么?

周文嘿嘿笑着去做PCR实验了。

PCR全称是PolymeraseChainReaction。

中文名是“聚合酶链式反应”,又称“聚酶链式反应”,是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。

能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段,于几小时内扩增至十万乃至百万倍。

其原理基本与人体细胞内DNA复制像似,但反应体系相对简单。

当然了,这不意味着PCR简单。

相反,PCR是非常难的.

首先通过高温“变性”,把一段双链结构的DNA解链,变成两条单链结构DNA。

之后“退火”,在低温下让“引物”和作为模板的DNA互补结合,形成局部双链。

最后中火“延伸”,通过DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链产生延伸反应,变成两条双链结构的DNA。

接下来不断重复这个过程。

1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……

通过PCR技术,可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。

比如亲子鉴定;

比如疫苗研究;

比如病毒疾病防治;

又或者遗传病研究等等,都需要大量用到PCR。

当然,周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验,其实是没有必要做PCR的。

蚜虫是一种很低级的虫子,一般直接用药物作用在其身上,然后看它的遗传特性就行了。

之所以还要做PCR,更多的目的也是为了学习PCR。

PCR反应体系包含了水、缓冲液、DNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)、引物P1P2DNA模板以及TAQ酶。

等一切都准备好之后,周文调节好提取枪的量程,然后提取30μl的水到三组PCR管里。

吸液的时候严格按照操作规程,垂直吸液、慢吸慢放。

换过枪头后,提取了5毫升的缓冲液到PCR管中。

再分别向管中加入DNTPP1P2DNA模板……

得益于这段时间的学习,除了一开始有些紧张外,周文做起来有条不紊。

等所需原料添加完毕后,接下来就是离心了。

按照要求设定好转速后,等了三分钟,离心完成。

周文从离心机里取出装着混合液的PCR管,立刻放到了PCR仪上,进行扩增。

设定94℃预变性4min。

然后设定20次循环扩增阶段。

高温、低温、中温、高温……

1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……

周文焦急的等待着,心情就像产房外的丈夫一样,心里默默祈祷着“母子平安”,同时也在想,不知道等会生出来的是男是女?身体健康与否?

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